預(yù)期用途
是一種經(jīng)過認(rèn)證的校準(zhǔn)溶液，旨在開發(fā)分析方法和準(zhǔn)確定量PnTX-G。CRM-PnTX-G的濃度使其適合于制備用于校準(zhǔn)液相色譜（LC）和液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）儀器的稀釋系列，以及用于回收實(shí)驗(yàn)的貝類對(duì)照樣品的加標(biāo)。
儲(chǔ)存和使用說明
為確保穩(wěn)定性，該材料應(yīng)在-12°C或以下未開封的條件下儲(chǔ)存。同樣，該材料的任何稀釋液都應(yīng)儲(chǔ)存在-12°C或以下的低頂空小瓶中。
打開前，應(yīng)將每個(gè)安瓿加熱至室溫，并將內(nèi)容物充分混合。安瓿應(yīng)在預(yù)先刻好的標(biāo)記處打開。安瓿打開后，應(yīng)使用校準(zhǔn)的容量設(shè)備取出準(zhǔn)確的等分試樣，并將其轉(zhuǎn)移到容量瓶或小瓶中。如果溶液打開超過幾分鐘，則會(huì)因甲醇蒸發(fā)而導(dǎo)致濃度增加。建議CRM-PnTX-G溶液不應(yīng)蒸發(fā)至干，因?yàn)椴ＡП砻婵赡軙?huì)有損失。注：溶液的體積未經(jīng)認(rèn)證。因此，安瓿的全部內(nèi)容物不應(yīng)簡(jiǎn)單地轉(zhuǎn)移到容量瓶中并稀釋至一定體積。
CRM-PnTX-G的制備
是在新西蘭Cawthron研究所從南澳大利亞收獲的受自然污染的太平洋牡蠣（Crassostrea gigas）中分離出來的[6]。通過1H核磁共振（NMR）證實(shí)了用于制備CRM-PnTX-G的PnTX-G的結(jié)構(gòu)和純度（圖1）。LC-MS/MS產(chǎn)物離子光譜顯示片段化，這是PnTX-G的特征（圖2）。LC-MS還用于估計(jì)PnTX-G儲(chǔ)備溶液的一般純度（3µm Hypersil BDS C8柱，150×2.1mm；流動(dòng)相由水（A）和乙腈/水（95/5）（B）組成，每個(gè)含有2mM甲酸銨和50mM甲酸（pH 2.3）；在20分鐘內(nèi)以200µL/min的速度從10至100%B進(jìn)行梯度洗脫+20°C柱溫）。未觀察到主要雜質(zhì)。然而，檢測(cè)到一些與PnTX相關(guān)的次要雜質(zhì)（[M+H]+=M/z 708）（圖3）。使用等度洗脫條件，PnTX雜質(zhì)相對(duì)于PnTX-G的總比例＜0.1%（柱：1.9µm Hypersil Gold C18，50×2.1 mm；如上所述的A和B溶劑；35%B，300µL/min+20°C柱溫）。
通過將純PnTX-G溶解在CD3OH中用于定量NMR來制備儲(chǔ)備溶液。CRM溶液是通過在脫氣的高純度甲醇（含0.01%乙酸）中準(zhǔn)確稀釋儲(chǔ)備溶液來制備的。將該溶液用Teflon攪拌棒和磁力攪拌器充分混合，同時(shí)在氬氣氛下的冰浴中冷卻。將等分試樣分配到干凈的充滿氬氣的琥珀色玻璃安瓿中，然后立即對(duì)其進(jìn)行火焰密封。
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